Гетерозиготная форма полиморфизма

Наследственные тромбофилии. Определение вариантов риска в генах F2, F5, F7, фибриназы, интегрина -а2 и b2, серпина.

Определение вариантов риска в генах F2, F5, F7, фибриназы, фибриногена,интегрина а2 и b2, серпина — метод генетической диагностики тромбофилических состояний при использовании ПЦР-анализа. Данные полиморфизмы являются наиболее частыми причинами врожденных тромбофилий.
Основные показания к применению: выявление нарушений в свертывающей системе крови у лиц с наличием тромбозов, инсультов, инфаркта миокарда, женщин с невынашиванием беременности, повышенная частота встречаемости тромбоэмболии у ближайших родственников.

Тромбофилия это патологическое состояние, характеризующееся нарушением системы свёртываемости крови при которой увеличивается риск развития тромбоза. В основе состояния лежат генетические нарушения (мутации в соответствующих генах) или приобретенные причины (опухоли, сахарный диабет, прием лекарств). Наиболее частыми провлениями тромбофилии являются тромбозы глубоких вен нижних конечностей, тромбоэмболия легочной артерии, тромбоз артерий (инфаркт миокарда, инсульт).
Помимо общепринятых тестов при изучении причин гемофилии, патологии свертывания крови (АЧТВ, фибриноген, тромбиновое время, протромбиновое время + МНО) для определения степени риска возникновения тромбозов, тромботических осложнений у беременных, невынашивания беременности применяется анализ позволяющий методом ПЦР выявить генетические маркеры риска нарушений свертывающей системы.

Данный генетический анализ позволяет выявить полиморфизмы генов, которые приводят к аномальному синтезу некоторых факторов свертывания крови. Это позволяет выявить причину и оценить риск развития венозных и артериальных тромбозов, тромбоэмболии легочной артерии, риск развития сердечно-сосудистой патологии вследствие нарушений в свертывающей системы крови (инфаркта миокарда и инсульта).

Полиморфизмы — это многообразие нуклеотидных последовательностей гена в геноме, его аллельных форм (т.е. фактически это мутации), кодирующих какой либо белок, встречающиеся чаще или реже среди населения. Многие из них не имеют никакого функционального значения, но некоторые могут вызывать значимые нарушения образования матричной РНК или белка (фермента, регуляторного белка). Полиморфизмы можно определить методом ПЦР-анализа, обнаруживая их у здоровых лиц, не являющихся родственниками больного.

  1. 1. Нарушение синтеза протромбина (протромбин — фактор свертывания крови № 2, один из основных белков плазмы крови, определяющий свертывание крови) — оценивается по полиморфизму в гене F2. Данное исследование позволяет обнаружить полиморфизм 20210 G->A в гене протромбина F2. В результате замены гуанина (G)на аденин (A) в позиции 20210 последовательности нуклеотидных оснований гена F2 происходит повышение продукции протромбина. Это повышение является фактором риска повышенного возникновения венозных тромбозов, эмболии легочной артерии, инфаркта миокарда. Считается, что лица гомозиготные по варианту А (А/А) по сравнению с нормой — лица с генотипом G/G в 3 раза имеют повышенный риск развития тромбозов и в 5 раз риск развития инфаркта миокарда после 50 лет жизни.
  2. 2. Нарушение в синтезе пятого фактора свертывания крови (проакцелерина) оценивается по гену F5 (названная также «Лейден-мутация»). Ген F5 кодирует белок фактора свертывания №5 (фактор Лейдена). Полиморфизм гена F5 1691 G->A (R506Q) заключается в замене гуанина (G) на аденин (A) в положении 1691 последовательности нуклеотидных оснований, что в конечном итоге приводит к замене аминокислоты аргинин на глутамин в 506 позиции белка. Такая замена клинически проявляется повышенной свертываемостью крови.
  3. 3. Исследование полиморфизма гена F7 – кодирующего проконвертин/конвертин. Фактор VII (проконвертин или конвертин) синтезируется в печени при участии витамина К. Участвует в образовании тканевой протромбиназы и превращении протромбина в тромбин. В позиции 10976 в гене F7 происходит замена гуанина (G) на аденин (А), с последующей заменой аминокислоты аргинин на глутамин в аминокислотной последовательности белка F7 (Arg353Gln). При этом изменяются свойства фермента, снижение активности F7 в результате замены способствует уменьшению тромбообразования. Вариант Arg353Gln (10976A) приводит к понижению экспрессии гена фактора VII и является защитным фактором в развитии тромбозов и инфаркта миокарда. Врождённый недостаток фактора VII обуславливает развитие болезни Александера (геморрагический диатез, гипоконвертинемия).
  4. 4. F13A1 — фибриназа, (фактор XIII). Фактор XIII (фибринстабилизирующий фактор, фибриназа, фактор Лаки—Лоранда) представляет собой фермент, a2-гликопротеид. Под действием фибриназы фибрин становится устойчивым к фибринолизину. Снижение активности фибриназы сопровождается уменьшением адгезивности и агрегации кровяных пластинок, и наоборот — при повышении активности фибриназы эти свойства тромбоцитов повышаются.
  5. 5. FGB — фибриноген. Фибриноген — гликопротеин, под действием тромбина превращается в нерастворимый в крови фибриллярный белок — фибрин, основное вещество тромба. В гене FGB закодирована аминокислотная последовательность бета-цепи фибриногена. Полиморфизм -455 G>А гена фибриногена заключается в замене нуклеотида гуанин (G) на аденин (А) в регуляторной части гена (промоторная часть). Такой вариант (вариант А) сопровождается повышенной экспрессией гена, что в свою очередь, приводит к увеличению содержания фибриногена в крови, повышая вероятность образования тромбов.
  6. 6. ITGA2-a2 — интегрин (тромбоцитарный рецептор к коллагену). Исследуемый полиморфизм 807 С>T (Phe224Phe), когда происходит замена цитозина на тимин. В гене ITGA2 закодирована аминокислотная последовательность тромбоцитарных рецепторов (интегринов). Интегрины — это молекулы межклеточной адгезии, которые присутствуют на поверхности различных клеток. Все белки, входящие в это семейство, состоят из двух нековалентно связанных полипептидых цепей (альфа и бета). Обе цепи пронизывают клеточную мембрану. При помощи этих рецепторов тромбоциты взаимодействует тканевыми белками при повреждении стенки сосуда и способствуют образованию монослоя тромбоцитов, что является одним из звеньев в системе предохранения организме от кровотечения. Изменение свойств рецептора при варианте Т влечет за собой увеличение скорости адгезии тромбоцитов, что повышает риск возникновения тромбофилии.
  7. 7. ITGB3-b3 — интегрин. Исследуемый полиморфизм — 1565 T < C (Leu33Pro), связанный с заменой тимина на цитозин в гене кодирующего рецептор. ITGB3 — b3 интегрин представляет собой тромбоцитарный рецептор к фибриногену, участвующий в процессах межклеточного взаимодействия. Основной функцией этого белка является обеспечение взаимосвязи между тромбоцитом и фибриногеном, вследствие чего происходит агрегация тромбоцитов и закупорка поврежденного эпителия. Мутации в этой области гена приводят к повышенной агрегации тромбоцитов, что является риском в возникновении заболеваний сердечно-сосудистой системы.
  8. 8. PAI-1 — серпин (serpin-1,PAI-1) — ингибитор активатора плазминогена. Исcледуемый полиморфизм — -675 5G>4G. Полиморфизм гена serpin-1 заключается в изменении количества повторов гуанина в промоторной области. Обнаружено два варианта гена с различным количеством повторов гуанина (G) в позиции 675, обозначаемых как 5G и 4G. 5G обозначает наличие пяти оснований гуанина, а 4G наличие четырех оснований гуанина. Вариант 4G является неблагоприятным вариантом, приводя к ослаблению фибринолитической активности крови за счет повышения концентрации в крови PAI-1. PAI -1 является одним из главных компонентом противосвертывающей системы, выступая регулятором тканевых активаторов плазминогена. Вариант 4G приводит к повышенной экспрессии гена и, следовательно, к повышенному содержанию PAI-1 в крови. Мутации снижают активность тромболитической системы, участвующей в деградации тромба, повышая, таким образом, риск тромбообразования. Гомозиготная мутация 4G/4G полиморфизма –675 4G/5G является фактором риска для развития тромбозов и инфаркта миокарда.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *